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第一章 绪论1

第一节 柱层析工艺在生物化工中的应用1

一、柱层析在分离纯化工艺中具有的优点2

二、层析工艺的种类3

三、层析工艺的应用4

第二节 生化分离介质应具备的特性5

一、生化分离介质应具备的基本条件6

二、生化分离介质的结构特点7

第三节 生化分离介质的分类8

一、依据母体骨架基质分类8

二、依据层析的分离原理分类9

参考文献10

第二章 分离介质母体——基球的合成11

第一节 悬浮聚合法制备珠体11

一、悬浮聚合法12

二、单体12

三、交联剂13

四、正相悬浮聚合分散剂种类15

五、反相悬浮聚合工艺中分散剂的种类及用量17

六、悬浮聚合工艺条件18

第二节 多孔珠体的制备19

一、多孔珠体的概念20

二、孔结构的表征20

三、聚合过程中的孔结构23

四、高比表面积珠体的合成方法25

五、大孔珠体的应用26

第三节 膜乳化-悬浮聚合法制备单分散聚合物微球27

一、膜乳化原理、装置与微球的粒度分布27

二、膜结构对分散液滴的影响29

三、连续相与分散相的影响30

四、操作条件的影响31

五、乳化过程中新乳化粒子形成的原因及解决办法32

第四节 微球的其他制备方法33

一、分散聚合法34

二、种子溶胀聚合法37

三、蒸馏-沉淀聚合法39

参考文献40

第三章 凝胶过滤层析介质44

第一节 凝胶过滤层析概述44

一、凝胶过滤层析的优点44

二、凝胶过滤层析的基本原理44

三、凝胶过滤层析介质的特征参数45

四、凝胶过滤层析工艺的常用参数45

第二节 凝胶过滤层析介质的制备47

一、凝胶过滤层析介质应具备的条件48

二、凝胶过滤层析介质的骨架分类48

三、多糖类凝胶过滤层析介质的合成49

四、合成高聚物珠体的制备53

第三节 凝胶过滤层析介质的主要商品牌号55

一、葡聚糖系列56

二、琼脂糖系列58

三、SuperdexTM系列60

四、聚丙烯酰胺系列61

五、SephacrylTM系列61

六、聚乙烯醇系列62

七、Bio-Beads S-X系列63

八、丙烯酸酯系列63

第四节 凝胶过滤层析的应用63

一、凝胶过滤层析的分离方式63

二、凝胶过滤层析介质的选择64

三、凝胶过滤层析柱的选择66

四、凝胶过滤层析操作中应注意的事项66

五、凝胶过滤层析的应用实例68

参考文献72

第四章 离子交换层析介质74

第一节 离子交换层析概述74

一、离子交换层析法74

二、离子交换层析介质的结构、分类及命名74

三、离子交换基本原理76

四、生物大分子的带电性77

五、生化用离子交换剂的特点77

六、离子交换层析的操作方式79

七、离子交换层析中常用的几个参数80

第二节 高聚物骨架离子交换层析介质的制备80

一、离子交换剂功能基团的种类80

二、苯乙烯系列离子交换树脂的制备82

三、生化专用苯乙烯系列离子交换剂的制备86

四、丙烯酸（酯）系列离子交换树脂的制备88

五、丙烯腈系列离子交换树脂的制备92

六、聚乙烯醇系列离子交换树脂的制备93

七、缩聚型离子交换树脂的制备93

八、螯合树脂的制备95

第三节 多糖骨架离子交换层析介质的合成及牌号99

一、多糖系列离子交换剂的合成路线99

二、多糖系列离子交换剂的制备100

三、纤维素类离子交换剂的主要牌号105

四、葡聚糖系列离子交换层析介质的主要牌号106

五、琼脂糖系列离子交换层析介质的主要牌号107

第四节 离子交换层析的应用110

一、离子交换剂的选择110

二、离子交换层析操作中应注意的问题111

三、离子交换层析应用实例115

参考文献124

第五章 疏水层析介质129

第一节 疏水层析概述129

一、疏水作用原理129

二、疏水层析的优点131

三、疏水层析与反相层析的区别132

第二节 疏水层析分离工艺的影响因素133

一、分离介质结构对疏水层析的影响134

二、流动相盐溶液对蛋白分离的影响135

三、pH值对疏水层析的影响136

四、温度对疏水层析的影响137

五、添加剂对疏水层析的影响137

六、蛋白质的疏水性对疏水层析的影响137

第三节 疏水层析分离介质的制备138

一、疏水层析分离介质的基本结构138

二、多孔硅胶疏水层析分离介质的制备139

三、溴化氰活化合成多糖类疏水层析分离介质140

四、环氧活化中间体制备多糖类疏水层析分离介质143

五、直接偶联法制备多糖类疏水层析分离介质148

六、以合成高聚物骨架为母体制备疏水层析分离介质150

七、以壳聚糖为母体合成疏水层析分离介质151

八、配基密度的测定151

九、常用疏水层析分离介质的商品牌号152

第四节 疏水层析分离介质的应用153

一、疏水层析分离介质的稳定性154

二、疏水层析分离介质的选择155

三、疏水层析操作中应注意的事项156

四、疏水层析的应用实例158

参考文献160

第六章 亲和层析介质163

第一节 亲和层析概述163

一、亲和层析发展历史163

二、亲和层析的原理164

三、亲和层析介质的组成165

第二节 亲和层析介质的制备171

一、溴化氰活化及偶联法171

二、环氧活化及偶联法173

三、高碘酸盐活化及偶联法176

四、N-羟基琥珀酰亚胺活化及偶联法177

五、三嗪活化及偶联法177

六、甲苯磺酰氯活化及偶联法177

七、丁二烯砜活化及偶联法178

八、苯醌活化及偶联法178

九、其他的活化及偶联法178

十、亲和层析介质的商品牌号179

第三节 亲和层析的类型183

一、生物亲和层析183

二、免疫亲和层析185

三、固定化金属亲和层析186

四、拟生物亲和层析195

参考文献199

第七章 吸附树脂204

第一节 吸附树脂概述204

一、吸附树脂结构特征204

二、吸附树脂的分类205

三、影响吸附树脂性能的因素206

四、吸附树脂的吸附机理207

五、吸附树脂的吸附方程209

六、吸附树脂的特点209

第二节 吸附树脂的外观、形态结构及孔结构参数的测定210

一、吸附树脂的外观及形态结构210

二、吸附树脂孔结构参数的测定211

三、吸附树脂孔结构测定应注意的问题213

第三节 吸附树脂的制备215

一、影响吸附树脂孔结构的因素216

二、通用型吸附树脂的制备220

三、超高比表面积吸附树脂的合成222

四、极性吸附树脂的制备230

五、缩聚型吸附树脂的制备235

六、碳化树脂的制备235

七、吸附树脂的商品牌号237

第四节 吸附树脂的应用241

一、吸附树脂使用前的预处理241

二、吸附树脂的安全性及纯度242

三、吸附树脂应用中的影响因素245

四、吸附树脂使用中的污染及复苏248

五、吸附树脂的应用实例248

参考文献252

第八章 柱层析新工艺及新介质255

第一节 扩张床吸附技术255

一、扩张床吸附技术简介255

二、扩张床的特性256

三、扩张床的操作257

四、膨胀吸附柱的基本性能257

五、扩张床吸附剂258

六、扩张床吸附技术应用264

第二节 分子印迹技术264

一、分子印迹聚合物的特点265

二、影响分子印迹聚合物性能的因素265

三、分子印迹聚合物的制备267

四、分子印迹聚合物的应用268

第三节 灌注色谱技术268

一、灌注色谱及其介质的特点268

二、灌注色谱原理270

三、灌注色谱介质的种类271

四、灌注色谱介质的制备273

五、灌注色谱的应用275

第四节 柱层析法进行蛋白质折叠复性276

一、柱层析法进行蛋白质复性的优点277

二、柱层析法进行变性蛋白质复性过程中应关注的问题278

三、不同柱层析法进行蛋白质复性举例280

参考文献286