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Ⅰ 细胞膜的基本构造1

1.细胞膜的研究历史1

2.液态镶嵌模型2

3.细胞膜的分子构造3

a.脂质3

b.蛋白质3

c.碳水化合物5

Ⅱ 基本技术6

1.透射电镜的基本技术-超薄切片法6

a.取材和细切7

b.前固定8

c.脱水8

d.包埋9

e.厚切片和修块11

f.超薄切片11

g.捞片11

h.电子染色11

2.冷冻复型法13

3.冷冻反转法16

4.负染色法19

5.扫描电子显微镜观察法20

a.酶细胞化学方法23

6.超高压电子显微镜观察法23

b.镧法24

c.铁氰化钾锇固定法24

7.细胞膜分离法24

a.大鼠肝细胞膜制备法24

b.各种组织细胞膜制备法25

c.细胞膜标本的纯度鉴定26

1-1 光学显微镜法29

a.PAS反应29

1.一般糖类的显示法29

Ⅲ 细胞膜复合糖类组织细胞化学29

b.胶体(透析)铁染色法30

c.爱尔新蓝(pH2.5)染色法30

d.爱尔新蓝(pH1.0)染色法31

e.醛复红染色法31

f.高铁二胺染色法32

g.唾液酸的直接证明法33

h.唾液酸与凝集素特异性结合的证明法33

i.O-乙酰化唾液酸的证明法34

j.通过甲基化-碱性水解的方法显示羟基和硫酸基35

k.利用酶法证明半乳糖和氨基半乳糖36

1-2 电子显微镜37

a.高碘酸盐--硫卡巴肼-蛋白银(PA-TCH-SP)染色法37

b.透析铁染色法38

c.钌红染色法38

d.阳离子化铁蛋白染色法39

e.高铁二胺染色法40

f.利用卵白素-生物素法证明唾液酸40

g.利用卵白素-生物素法证明半乳糖残基41

2-1 荧光法42

2.免疫组织细胞化学显示法42

2-2 酶标记法44

2-3 铁蛋白标记法50

2-4 胶体金法53

2-5 复合糖类抗体法55

2-6 放射自显影法59

3.糖脂的显示法62

a.一般组化染色64

b.抗体的染色法65

c.利用生物毒素的染色法67

1.膜组分的脂类检出法69

Ⅳ 细胞膜脂类的组织细胞化学法69

2.冷冻复型法显示膜脂质72

Ⅴ 细胞膜和骨架蛋白质的显示法75

Ⅵ 细胞膜表面抗原显示法79

1.荧光抗体法79

a.染色标本的制备79

b.膜荧光法的实际操作81

2.酶抗体法84

2-1 免疫细胞84

a.悬浮细胞表面抗原显示法85

b.冷冻切片的表面抗原显示法87

2-2 肿瘤标记88

3.铁蛋白抗体法92

a.铁蛋白抗体结合物的制备93

b.铁蛋白抗体结合物的精制法94

c.铁蛋白抗体纯度和活性测定法95

d.铁蛋白抗体和标本反应的方法95

4.免疫扫描电镜法96

4-1 病毒标记法96

4-2 胶乳标记法98

4-3 放射自显影100

b.SEM-ARG的操作技术101

a.SEM-ARG的样品制作法101

c.观察和几点问题102

5.纤维连接蛋白的显示法103

a.纤维连接蛋白的特性103

b.纤维连接蛋白的机能显示法103

c.纤维连接蛋白的蛋白质化学显示法104

d.纤维连接蛋白的免疫细胞化学显示法105

Ⅶ 细胞表面受体的显示方法107

1.激素受体107

a.眼镜蛇毒b显示法111

2.神经递质受体111

2-1 乙酰胆碱受体111

2-2 α-金环蛇毒素(α-BGT)结合部位114

2-3 γ-氨基丁酸(GABA)受体116

2-4 甲硫氨酸-脑啡肽受体121

2-5 多巴胺受体122

Ⅷ 细胞膜酶的显示法125

1.NADPH氧化酶125

2.胆碱乙酰转移酶126

3-1 乙酰胆碱酯酶活性显示法128

a.Karnovsky法128

3.乙酰胆碱酯酶128

b.Lewis和Shute法130

3-2 冷冻复型法132

3-3 扫描电镜法133

4.碱性磷酸酶133

4-1 活性显示法133

a.金属盐法134

b.偶氮色素法135

c.碱性磷酸酶活性的局部定位136

4-2 免疫学显示法136

4-3 扫描电镜法139

5.对硝基苯磷酸酶140

a.哇巴因敏感，钾依赖性对硝基苯磷酸酶140

b.哇巴因非敏感，钾非依赖性对硝基苯磷酸酶141

c.H+-K+-三磷酸腺苷酶143

d.酸性对硝基苯磷酸酶144

6.5′-核苷酸酶144

a.酶组织化学的显示144

b.免疫组织化学的显示146

7.Mg2+-三磷酸腺苷酶147

8.Na+-K+-三磷酸腺苷酶150

9.Ca2+-三磷酸腺苷酶154

10.腺苷酸环化酶与鸟苷酸环化酶156

11.碳酸酐酶158

Ⅸ 示踪法观察细胞连接161

1.镧标记法161

2.过氧化物酶法162

3.酶抗原法和酶抗体法164

Ⅹ 细胞膜机能基的显示法167

1.氨基显示法167

1-1 氢醌-TNBT法167

1-2 二硫化氨甲酰化法168

2.巯基(SH)显示法169

1-3 其他方法169

2-1 巯基显示法170

a.DDD-FBBBN法170

b.FBBBN法171

c.MO法172

d.MC法173

e.特异性的鉴定174

2-2 冷冻复型法175

Ⅺ 各种细胞膜的组织细胞化学特征177

1.消化道上皮细胞膜177

a.消化道上皮样品制作时的注意事项177

b.消化道上皮细胞膜的细胞化学178

2.肝细胞膜179

a.碱性磷酸酶180

b.5′-核苷酸酶180

c.Mg2+-三磷酸腺苷酶180

d.钾依赖性-P-对硝基苯磷酸酶180

e.Ca2+-三磷酸腺苷酶181

f.腺苷酸环化酶181

3.肾、肾小管上皮细胞膜181

4.肺泡的上皮细胞膜183

a.腺苷酸环化酶(AC)和鸟苷酸环化酶(GC)186

5.血管内皮细胞膜186

b.ATP酶，ADP酶，AMP酶188

6.神经细胞膜190

7.膀胱上皮细胞膜192

a.移行上皮192

b.腔侧细胞膜193

c.运用光衍射法及光滤过法进行腔侧细胞膜分析194

d.移行上皮细胞膜的组织化学196

8.培养的癌细胞膜198

主要参考文献203

后记205